超微量核酸蛋白分析儀是高精度光學儀器,在出廠前經(jīng)過精細的裝配和調(diào)試,如果能對儀器進行正確的使用和保養(yǎng),不僅能保證儀器的可靠性和穩(wěn)定性,也可以延長儀器使用壽命。那么儀器使用過程有哪些誤區(qū)呢?下面,小編將為大家例舉一下。
超微量核酸蛋白分析儀的使用誤區(qū):
1、測量核酸時發(fā)現(xiàn)結(jié)果不準:首先要確定核酸樣品的純度,如果是DNA樣品,260/280比值應該在1.6-2.0之間。比值小于1.6說明有蛋白類物質(zhì)的干擾,大于2.0說明有RNA的干擾。如果是RNA樣品,260/280應該大于2.0,如果值偏高如2.5以上,可能是RNA降解的原因,如果小于2.0說明有蛋白類物質(zhì)的干擾。
我們還可以通過230nm、和320nm處的吸收峰來判斷樣品的純度,230表示存在以下污染物如:碳水化合物、多肽、苯酚等,核酸和蛋白在320nm處的吸收峰幾乎為零,所以如果有吸收說明有雜質(zhì),可能是稠環(huán)芳香有機試劑的污染。
2、適合測量純度高的蛋白樣品,不能測量含有雜質(zhì)的蛋白樣品:通過公式:A=E*b*c,我們能夠發(fā)現(xiàn),c值是與吸光度A成正比的,如果樣品中含有雜質(zhì)成分,且雜質(zhì)在280處有吸收峰的話就會造成測量值不準,一般我們提蛋白過程中使用的有機試劑如果殘留的話就會造成測量蛋白值不準的情況。
3、測量兩個樣品中間務必要用吸水的面巾紙和蒸餾水清潔超微量核酸蛋白分析儀測量臂:如果不做清潔,殘留的樣品會對后來樣品的測量造成影響。切記不要用擦鏡紙擦拭,因為擦鏡紙不吸水。
4、測量同一個樣品的時間不宜過長:因為上樣量很少,隨著時間的推遲樣品會有所蒸發(fā),造成測量出來的濃度有誤差。
5、如果測量值不是很準,建議可以把樣品稀釋到適當濃度再進行測量。
6、如果感覺超微量核酸蛋白分析儀的平衡性不好,可以通過以下方法檢測:反復測量空氣,兩次測量之間間隔5秒,測出的吸光度值應該小于0.04,說明平衡性良好。