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動物源性DNA檢測試劑盒應(yīng)當(dāng)怎樣操作?
  動物源性DNA檢測試劑盒需要嚴(yán)格按照操作步驟操作,試劑配制和加樣等步驟請嚴(yán)格按照說明書要求在冰盒上操作。
 
  反應(yīng)液中的成分對光敏感,應(yīng)避光保存。試劑使用前要*解凍,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,推薦使用前離心30秒,并按檢測頻次將反應(yīng)液以適當(dāng)體積分管保存。擴增管請置于密封袋內(nèi)丟棄,當(dāng)日清理,開蓋易造成氣溶膠污染,禁止開蓋。
 
  建議使用試劑配套動物基因組DNA提取系列產(chǎn)品,具體過程詳見產(chǎn)品說明書。剪下所需測試數(shù)的已含有反應(yīng)液的PCR管,放置在室溫待解凍后,離心30秒后揭開封口膜,向每管反應(yīng)液中分別加入5μL模板,順序為NG、待測樣品模板。蓋好配套的PCR管蓋后,渦旋混勻30秒,離心1分鐘,立即進行PCR擴增反應(yīng)。
 
  需要按試劑準(zhǔn)備中描述的方法,配制好動物源性DNA檢測試劑盒各種組分的工作液。
 
  所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫,標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品,建議做復(fù)孔。
 
  從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
 
  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,樣本孔加待測樣本50μL,空白孔不加。
 
  用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60分鐘。
 
  除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,加入過氧化物酶標(biāo)記的檢測抗體100μL。
 
  揭開封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置20s,甩去洗滌液,吸水紙上拍干。
 
  將底物A和B按1:1體積充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL,用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15分鐘;
 
  如此重復(fù)4次,若使用自動洗板機,請按洗板機操作程序進行洗板,添加浸泡20秒的程序,可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應(yīng)板。

上海睿玥實驗器材有限公司主營產(chǎn)品:全自動熔點測定儀,梯度PCR基因擴增儀,平行反應(yīng)合成儀
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